尚于博的父母都是从事艺术类工作，他从小就随父母到深圳生活，因为父母下海经商繁忙，他从小就养成了独处的习惯。高中时，学校组织了戏剧社，尚于博成为开社大戏《罗密欧与朱丽叶》的主演。高考时他以670分的优异成绩考入中央戏剧学院表演系2001级，与张歆艺、牛萌萌等是同班同学。

2004年，还在读大三的尚于博出演了个人的首部电影《枪手》，在片中饰演肖聪。大学期间，尚于博在班级担任学习委员，也获得过专业主课成绩的优秀奖，当很多同学开始接戏时，他一直踏踏实实在学校排小品，他当时的梦想是成为一名优秀的舞台剧演员，毕业后能够在国家级话剧团体工作。大四时，尚于博与同学一起投资做了小剧场话剧《长椅逸事》，他在剧中扮演一个有梦想的工人，也因为这出戏他被频繁地邀请到外地进行演出。

2005年，与富大龙、谢润、周知合作主演现代军旅剧《陆军特战队》，在剧中饰演白凌云的追求者聂志远，这是他的首部电视剧作品，从而正式进入演艺圈。

2006年，与张柏芝、潘粤明、潘虹合作主演民国情感剧《天涯歌女》，在剧中饰演女主角周旋的好朋友赵丹。

2008年，与孙淳、剧雪、吴竞合作主演年代情感剧《天涯咫尺》，在剧中饰演龙家的长子龙贯一。

2009年，与马雅舒、江祖平、何赛飞合作主演家庭情感剧《娘家的故事》，在剧中饰演沈万海和林秋萍的儿子沈建弘；同年，与王珞丹、李光洁、李彩桦合作主演都市励志偶像剧《杜拉拉升职记》，在剧中饰演女主角杜拉拉的前男友李鸿明。

2010年，与马丽、汤加丽、杨沅翰合作主演话剧《你在红楼，我在西游》，在剧中饰演男主角贾宝玉；同年2月，担任“美国华人春节联欢晚会”的主持人；同年，与周楚楚、孙凯合作主演爱情电影《野草莓》，在片中饰演痴情专一且为了爱情不顾一切的男主角祝福忠；同年，他又出演了家庭情感剧《娘家的故事2》，在剧中饰演男一号沈建弘。

2011年2月21日，其主演的抗战剧《海峡往事》在央视八套播出，在剧中饰演单纯善良的日本特工雄一；同年，与马雅舒、何赛飞、江祖平合作主演家庭情感剧《娘家的故事3》，在剧中饰演沈家小儿子沈建弘；同年，与温峥嵘、王嘉、丁海峰合作主演剿匪题材电视剧《瑶山大剿匪》，在剧中饰演心思缜密且善于观察的飞狐小队成员莫三甲；同年，他还出演了娄烨执导的爱情电影《花》。

2013年11月，其主演的电影《野草莓》在北京大学百周年讲堂举行了首映礼，这也是他最后一部面世的作品。

2011年10月25日，尚于博因患抑郁症，在北京跳楼自杀身亡，年仅28岁；同年11月13日，其遗体告别仪式在北京昌平举行。

尚于博是一个地道的湖北伢，他不仅开朗幽默，而且果断耿直。尚于博的性格温和，属于沉默内敛型。

尚于博为人低调、谦和、内敛，他有阳光的一面，也有忧郁的一面，他做事认真并且很努力。

尚于博拥有硬朗的外形和忧郁的气质，他能够很好地塑造当代军人形象，他的骨子里具备阳光、果敢、喜欢自由和挑战的性格元素。尚于博能够很好地把握剧中人物的心态，并且拿捏表现的也很有分寸。他不仅形象帅气，演技也很出色。尚于博拥有184cm的身高和英俊的外形，他颇具日韩明星的雅痞文艺气质，而他的眼神还很迷人。

尚于博在电视剧《瑶山大剿匪》中颠覆自我固有的角色形象，凭借自身特有的特质与远超出同龄演员的演技，诠释出迥然不同的角色性格。